O-Sense
叶肉保钾能力检测
经典案例
Int J Mol Sci联盟专家S Shabala等：盐胁迫下NHXs调节耐盐水稻叶肉排Na+、K+速率下降 为水稻耐盐研究提供新见解
Tree Physiol 中国林科院张华新、杨秀艳：NMT发现白刺通过维持叶肉排Na+保K+能力及H+泵活性来适应盐胁迫
推荐实验设备
NMT耐盐机制分析仪（NMT300-SMP-YG/XY）
实验意义
探究盐胁迫下植物的保钾能力，K+外排越小，保钾能力越强。
检测指标
K+
样品培养及处理
苗龄
苗龄无强制要求。该实验使用苗期样品较多，常见样品苗龄参考：
拟南芥：1~4周
水稻：1~5周
烟草：1~3周
杨树：4~7周
棉花：1~4周
培养方式
水培、琼脂培养基、土培、沙培均可。
实验处理
100~400 mM NaCl处理24小时。NaCl或Na2CO3+NaHCO3浓度与您该课题的其它实验胁迫浓度保持一致。常见样品胁迫浓度参考：
拟南芥、水稻、烟草：100~150 mM NaCl
棉花：200 mM NaCl
样品选取
1.植株选取
选取状态良好且外观形态在组内占主流的植株。
2.叶片选取
1）根据您的研究需求，选择植株上特定位置的叶片，例如从下往上数的第x片叶片。部分研究可能无此要求，同一研究的叶片选取标准需保持一致。
2）同一组内，叶龄、叶片颜色、大小尽量一致
3）优先完整无损伤的叶片
检测流程
前处理
1.从目标叶片上剪取1cm*1cm的叶片组织，揭去叶片组织的下表皮，暴露叶肉组织。如果叶片面积较小，直接用整片叶片。
叶片暴露叶肉组织
2.对折叶片，叶片下表面朝外，让暴露出叶肉组织处于外侧弯折面处，使用铝箔条将远离弯曲面的叶片组织条尾部夹住，使用样品固定专用树脂块将样品压在培养皿底部，露出叶片弯折处的叶肉组织。
叶肉细胞样品固定
3.加入测试液浸没叶片，静置2小时，不同规格的培养皿对应加入测试液体积：
35/60/90 mm培养皿，分别对应4/10/40 mL测试液。
样品前处理视频
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检测过程
1.检测位点：外侧弯曲面的叶肉组织上的任意一点
2.检测时长：5-10分钟
3.重复数：n≥8，即每组检测不少于8块叶片组织。如同一株样品有多片叶片符合检测要求，可在同一株上取不止1片叶片，也可在同一片叶片上取不止1块叶片组织，一组实验使用的植株数不可少于3株。
耗材清单
测试液：50 mM NaCl, 1.0 mM KCl, 0.2 mM MES, pH5.8
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检测参数
1.物镜倍数：4倍
2.采样规则：X-30
3.传感器--样品表面距离：5μm
参考文献
1.许越.非损伤微测技术—2022[J].NMT通讯,2023(01):3-9.DOI:10.5281/zenodo.8227586.
2.Li S, Sun M, Miao L, et al. Multifaceted regulatory functions of CsBPC2 in cucumber under salt stress conditions. Hortic Res. 2023 Mar 15;10(5):uhad051. doi: 10.1093/hr/uhad051.
3. Solis C, Yong M, Zhou M, et al. Evolutionary Significance of NHX Family and NHX1 in Salinity Stress Adaptation in the Genus Oryza. Int J Mol Sci. 2022 Feb 14;23(4):2092. doi: 10.3390/ijms23042092.
4. Lan T, Xu Y, Guo S, et al. Investigation of Na+, K+ and Ca2+ distribution and ion fluxes of the halophyte Chinese iris under NaCl stress by non-invasive micro-test techniques.Research Square, 2022 DOI: 10.21203/rs.3.rs-1708018/v1