O-Sense
盐胁迫跨膜钙信号检测
经典案例
Plant Cell Environ北林陈少良：H2O2和Ca2+调节植物盐胁迫下的K+/Na+平衡
Hortic Res 江苏师大学者：NMT结合根系转基因技术快速验证耐盐基因功能
推荐实验设备
NMT耐盐机制分析仪（NMT300-SMP-YG/XY）
实验意义
检测盐胁迫下根、茎、叶细胞的Ca2+实时跨膜吸收（内流）速率。
检测指标
Ca2+
样品培养及处理
苗龄
苗龄无强制要求。该实验使用苗期样品较多，常见样品苗龄参考：
拟南芥：1~4周
水稻：1~5周
烟草：1~3周
杨树：4~7周
棉花：1~4周
培养方式
水培、琼脂培养基、土培、沙培均可，推荐使用水培和琼脂培养，其次是沙培和基质较松散的土培。
实验处理
正常培养的植物样品
样品选取
1.植株选取
选取状态良好且外观形态在组内占主流的植株。
2.根、叶片、茎选取
状态良好且外观较为一致。
检测流程
前处理
1.在35mm培养皿中滴入一滴测试液，使用镊子将固定样品玻片放置到培养皿中，并压一下玻片使其贴在皿底。
2.吸取100μL原生质体悬液，滴入到35mm培养皿中的固定样品玻片中心处，静置10分钟，
3.向培养皿中缓慢加入4mL测试液，再吸出弃去。
4.再次缓慢加入4mL测试液，静置10min。
样品前处理视频
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检测过程
1. 先检测盐处理前的信号，再瞬时加入1 mL盐处理母液（500 mM NaCl, 0.1 mM CaCl2, 500 mM 甘露醇, 0.2 mM MES, pH5.8）后，检测处理后信号。
2.检测位点：原生质体表面
3.检测时长：盐处理前5分钟，盐处理后10~20分钟
4. n≥10，即每组检测不少于10个原生质体。如同一培养皿中有多个原生质体符合检测要求，可在同一培养皿中检测不止1个原生质体。
耗材清单
测试液：1.0 mM NaCl, 0.1 mM CaCl2, 500 mM 甘露醇, 0.2 mM MES, pH5.8
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检测参数
1.物镜倍数：20倍
2.采样规则：X-10
3.传感器--样品表面距离：2μm
参考文献
1. 许越.非损伤微测技术—2022[J].NMT通讯,2023(01):3-9.DOI:10.5281/zenodo.8227586.
2. Zhang L, Liu X, Wei M, et al. Ammonium has stronger Cd detoxification ability than nitrate by reducing Cd influx and increasing Cd fixation in Solanum nigrum L. J Hazard Mater. 2021 Dec 1;425:127947. doi: 10.1016/j.jhazmat.2021.127947.
3. Zhu M, Li Q, Zhang Y, et al. Glycine betaine increases salt tolerance in maize (Zea mays L.) by regulating Na+ homeostasis. Front Plant Sci. 2022 Sep 30;13:978304. DOI: 10.3389/fpls.2022.978304.
4. Liu J, Ma J, He C, et al. Inhibition of cadmium ion uptake in rice (Oryza sativa) cells by a wall-bound form of silicon. New Phytol. 2013, 200: 691-699. doi: 10.1111/nph.12494.