根铵硝吸收速率检测

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经典案例

Plant Physiol 中国农业大学 韩振海：发现抑制bHLH130可提升低N下苹果吸NO₃^-速率 为探究bHLH130调控苹果低N适应机制提供证据

Plant Cell Environ 南师大戴传超组：根系内生真菌调节互作界面氮通量，影响宿主对不同氮素形式的响应

 

推荐实验设备

NMT植物养分高效机制分析仪（NMT300-NMP-YG/XY）

 

实验意义

检测根实时吸收NH₄⁺/NO₃^-速率。

 

检测指标

NH₄⁺、NO₃^-

 

样品培养及处理

苗龄

苗龄无强制要求。该实验使用苗期样品较多，常见样品苗龄参考：

拟南芥：1~4周

水稻：1~5周

烟草：1~3周

杨树：4~7周

棉花：1~4周

 

培养方式

水培、琼脂培养基、土培、沙培均可，推荐使用水培和琼脂培养，其次是沙培和基质较松散的土培。

 

样品选取

1.植株选取

选取状态良好且外观形态在组内占主流的植株。

2.根选取

1）主根或侧根均可，同一研究需保持一致，即都是主根或都是侧根。

2）同一组内，根长、根直径、根颜色尽量一致。

3）优先新生根或嫩根。

 

检测流程

前处理

1.将样品取出，使用滤纸条和样品固定专用树脂块将样品的一条根，按压固定在培养皿底部。体积较小样品，可整株置于培养皿中；如体积较大，剪取目标根并固定好。

 

样品固定

2.加入测试液浸没根，静置30min，不同规格的培养皿对应加入测试液体积：

35/60/90 mm培养皿，分别对应4/10/40 mL测试液。

 

样品前处理视频

 

检测过程

1.检测位点：根成熟区。距离根尖顶点2500μm的位置

2.检测时长：5-10分钟

3.重复数：n≥8，即每组检测不少于8条根。如同一株样品有多条根符合检测要求，可在同一株上取不止1条根，一组内使用的植株数不可少于3株。

 

耗材清单

测试液：a mM NH₄⁺,b mM NO₃^-,0.2 mM MES, pH5.8（a、b与培养液/处理液中的NH₄⁺、NO₃^-浓度保持一致，测试液中铵盐、硝盐成份也与培养液/处理液中的成份保持一致）

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检测参数

1.物镜倍数：4倍（根直径≥200μm）；10倍（根直径＜200μm）

2.采样规则：X-30

3.传感器--样品表面距离：5μm

 

参考文献

1. 许越.非损伤微测技术—2022[J].NMT通讯,2023(01):3-9.DOI:10.5281/zenodo.8227586.

2.Liu B, Feng C, Fang X, et al. The anion channel SLAH3 interacts with potassium channels to regulate nitrogen-potassium homeostasis and the membrane potential in Arabidopsis. Plant Cell. 2023 Jan 19:koad014. doi: 10.1093/plcell/koad014.

3.Fang X, Liu X, Zhu Y, et al. The K⁺ and NO₃^- Interaction Mediated by NITRATE TRANSPORTER1.1 Ensures Better Plant Growth under K⁺-Limiting Conditions. Plant Physiol. 2020 Dec;184(4):1900-1916. doi: 10.1104/pp.20.01229.