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钾高效机制:“胞浆-液泡”钾分配检测


推荐实验设备

NMT植物养分高效机制分析仪(NMT300-NMP-YG/XY)

 

实验意义

探究低钾环境下,钾高效材料的钾高效利用机制,是否与该材料细胞,将更多的K+分配到胞浆有关。根、茎、叶的液泡排K+相对较强,或吸K+相对较弱,代表该材料可能是通过该机制提升钾利用率。

 

检测指标

K+

 

样品培养及处理

苗龄

苗龄无强制要求。该实验使用苗期样品较多,常见样品苗龄参考:

拟南芥:1~4周

水稻:1~5周

烟草:1~3周

杨树:4~7周

棉花:1~4周

 

培养方式

水培、琼脂培养基、土培、沙培均可,推荐使用水培和琼脂培养,其次是沙培和基质较松散的土培。

 

样品选取

1.植株选取

选取状态良好且外观形态在组内占主流的植株。

2.根、叶片、茎选取

状态良好且外观较为一致。

 

检测流程

前处理

1.在35mm培养皿中滴入一滴测试液,使用镊子将固定样品玻片放置到培养皿中,并压一下玻片使其贴在皿底。

2.吸取100μL液泡悬液,滴入到35mm培养皿中的固定样品玻片中心处,静置10分钟,

3.向培养皿中缓慢加入4mL测试液,再吸出弃去。

4.再次缓慢加入4mL测试液,静置10min。

 

样品前处理视频

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检测过程

1.检测位点:液泡表面

2.检测时长:5-10分钟

3.重复数:n≥10,即每组检测不少于10个液泡。如同一培养皿中有多个液泡符合检测要求,可在同一培养皿中检测不止1个液泡。

 

耗材清单

测试液:

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检测参数

1.物镜倍数:20倍

2.采样规则:X-10

3.传感器--样品表面距离:2μm

 

参考文献

1. 许越.非损伤微测技术—2022[J].NMT通讯,2023(01):3-9.DOI:10.5281/zenodo.8227586

2. Zhang X, Shen Z, Sun J, et al. NaCl-elicited, vacuolar Ca(2+) release facilitates prolonged cytosolic Ca(2+) signaling in the salt response of Populus euphratica cells[J]. Cell Calcium, 2015, 57(5-6): 348-365. doi: 10.1016/j.ceca.2015.03.001.