台医大 Chemosphere：（作者讲解视频）NMT揭示以斑马鱼为研究对象的氨毒理机制
基本信息
主题：NMT揭示以斑马鱼为研究对象的氨毒理机制
期刊：Chemosphere
研究使用平台：NMT毒理科研创新平台
标题：Ammonia exposureimpairs lateral-line hair cells and mechanotransduction in zebrafish embryo
作者：台北医学大学洪君琳
检测指标
Ca2+、NH4+
检测样品
斑马鱼侧线毛细胞
离子/分子流实验处理方法
①胚胎在浓度的NH4Cl（0, 5, 10, and 20 mM）中孵育96h
②受精后96h的胚胎在不同浓度的NH4Cl（0, 1, 5, and 10 mM）中孵育0.5h
③受精后96h的胚胎在5mM NH4Cl或5mM NH4Cl加阻滞剂（10mmM新霉素或10mM La3+）中0.5h
离子/分子流结果
用NMT分析毛束处Ca2+内流，评价毛细胞功能（图1A显示了微电极检测L1神经丘毛束的图像）。10mM组和20mM组的Ca2+内流分别减少了33%和43%（图1B）。
图1
胚胎在NH4Cl暴露30min后，1、5和10 mM NH4Cl组的Ca2+内流分别显著减少45%、65%和75%（图2A）。0-和1-mM NH4Cl组毛细胞的NH4+流速非常低，而在5-和10-mM NH4Cl组中测量到显著的NH4+内流（图2B）。
图2
用La3+和新霉素来验证NH4+在毛细胞的内流是通过MET通道介导的。将胚胎预暴露于5mM NH4Cl（含或不含阻断剂）30 min后，记录NH4+在神经丘毛细胞的内流。结果表明，新霉素（10mM）和La3+（10mM）组的NH4+内流分别减少了60%和50%（图3）
图3
其他实验结果
氨暴露后，斑马鱼胚胎的体长、心率和耳泡大小均减小。
氨暴露后，侧线毛细胞的数量和功能下降。
外侧毛细胞对氨暴露敏感。
结论
综上所述，本研究综述了亚致死氨暴露对斑马鱼胚胎早期发育和侧线毛细胞的毒性作用。数据表明，氨通过干扰MET通道介导的Ca2+内流而损害毛细胞。氨对鱼类侧线系统存在不利影响，可能影响鱼类的行为，对自然生态系统中的鱼类生存造成严重威胁。
离子流实验使用的测试液
0.5 NaCl, 0.2 CaSO4, 0.2 MgSO4, 0.16 KH2PO4, 0.16 K2HPO4，pH 7.0
文章链接：https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0045653520313631
2019版《NMT论文集》已出版
关键词：非损伤微测技术，Ca2+、NH4+流速，斑马鱼
