台大：抗利尿激素调节离子和酸碱平衡的机制 | NMT斑马鱼创新科研平台
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基本信息
主题：抗利尿激素调节离子和酸碱平衡的机制
期刊：International Journal of Molecular Sciences
研究使用平台：NMT斑马鱼创新科研平台
标题：Arginine Vasopressin Modulates Ion and Acid/Base Balance by Regulating Cell Numbers of Sodium Chloride Cotransporter and H+-ATPase Rich Ionocytes
作者：台湾大学周铭翊、中研院细胞与个体生物学研究所黃鹏鹏
检测指标
H+
检测样品
斑马鱼胚胎皮肤离子细胞
中文摘要（谷歌机翻）
精氨酸加压素（Avp）是一种保守的多效激素，已知可以调节水的重吸收和离子平衡。然而，影响其作用的许多机制仍不清楚。在这里，我们使用斑马鱼胚胎来研究Avp如何调节离子和酸碱稳态。将胚胎在双蒸水中孵育24小时后，avp mRNA表达水平显着上调。通过反义寡核苷酸吗啉代（MO）敲低AVP蛋白表达的减少的ionocyte相关基因的表达和下调全身氯-含量和H+的分泌，而Na+和Ca2+水平不受影响。AVP拮抗剂SR49059孵育还下调氯化钠协同转运蛋白2B（的mRNA表达ncc2b），这是负责氯转运-摄取。相应地，avp morphant显示较低的NCC和H+-ATPase富集（HR）细胞数目，但Na+/K+-ATPase富集（NaR）细胞数目保持不变。avp MO还下调了foxi3a和p63表达细胞的数量。最后，降钙素基因相关肽（cgrp）及其受体降钙素受体样1（1crlr1），在被下调AVP morphants，这表明AVP可能影响CGRP和Crlr1调制氯-平衡。总之，我们的结果揭示了Avp调节离子和酸碱平衡的分子/细胞途径，从而提供了对其功能的新见解。
离子/分子流实验处理方法
斑马鱼胚胎在1-2细胞期
· 对照组
· 精氨酸加压素（Avp）敲低组
离子/分子流结果
Avp敲低组斑马鱼胚胎离子细胞，H+分泌较对照组弱。
NMT非损伤微测技术检测斑马鱼皮肤离子细胞
其他实验结果
Avp及其受体在斑马鱼组织中广泛表达。
avp敲低下调Avp蛋白表达。
Avp调节离子细胞的功能。
Avp调节斑马鱼胚胎皮肤上的离子细胞数量。
Avp敲低组显示Cgrp及其受体Crlr1的表达减少 。
结论
斑马鱼胚胎在双蒸水中孵育24h后，avp mRNA表达水平显著上调。通过反义吗啉寡核苷酸（MO）敲低Avp蛋白表达，降低了离子细胞相关基因的表达，降低了全身Cl-含量和H+分泌，而Na+和Ca2+水平不受影响。Avp拮抗剂SR49059的孵育也下调了氯化钠共转运蛋白2b（ncc2b）的mRNA表达，该转运蛋白是一种负责Cl-吸收的转运蛋白。相应地，avp敲低组的NCC和富含H+-ATPase（HR）细胞数较低，但富含Na+/K+-ATPase（NaR）细胞数保持不变。Avp敲低组中foxi3a和p63表达细胞的数量也有下调。最后，cgrp及其受体crlr1的mRNA表达水平在Avp敲低组中下调，表明Avp可能影响Cgrp和Crlr1调节Cl-平衡。
离子流实验使用的测试液
300 µM 3-(N-morpholino)propanesulfonic acid (MOPS) buffer (Sigma), 0.1 mg/L ethyl 3-aminobenzoate (Tricaine, pH 7.0)
文章链接：https://www.mdpi.com/1422-0067/21/11/3957
2019版《NMT论文集》已出版
关键词：非损伤微测技术，H+流速，斑马鱼
