1、表型研究

1）定量检测样品排/吸Na⁺速率，直接表征Na-H 逆向转运体、Na-H 交换体活性，验证SOS1、NHX1等功能

2）定量检测样品失K⁺速率，直接表征其综合耐盐保K⁺能力

3）定量检测活体样品内外部不同位置的Na⁺、K⁺浓度

2、机制研究

1）保K⁺机制

a. 外向K⁺ 通道（GORK）耐盐保K⁺贡献率
定量检测盐胁迫下的排H⁺速率，结合其保K⁺能力，判断耐盐/保K⁺能力强的样品，其保K⁺机制是否是通过活跃的PM H⁺-ATPase 排H⁺，促盐胁迫下质膜复极化，关闭GORK，从而达到保K⁺效果

b. 非选择性阳离子通道（NSCC）耐盐保K⁺贡献率
以K⁺外排速率为落脚点，从激活NSCC 的关键信号ROS 及ROS 胞内胞外产生的途径，利用RBOHs 突变体、RBOH 抑制剂、胞内ROS 清除剂等，验证是否通过调节NSCC实现保K⁺及其调节机制

2）质子泵H⁺-ATPase
检测盐胁迫下的实时排H⁺速率，用最直接的指标定量表征盐胁迫下H⁺-ATPase 活性提升的程度

3）Ca²⁺信号转导
以排/ 吸Na⁺速率、失K⁺速率为落脚点，结合Ca²⁺通道抑制剂、Ca²⁺螯合剂、外源Ca²⁺，以及Na-H 逆向转运体抑制剂、Na-H 交换体抑制剂、K⁺通道抑制剂、H⁺-ATPase 抑制剂，辅以外源ROS，验证Ca²⁺信号是否参与了促植物排Na+、液泡区隔Na⁺、保K⁺等过程，以及这一过程中的Ca²⁺信号转导机制

1、表型研究

1）定量检测根、叶、藻、生物膜、细菌、真菌等活样，对环境中Cd²⁺/Cu²⁺/Pb²⁺的实时吸收速率

2）定量检测Cd²⁺/Cu²⁺/Pb²⁺在活体植物体内的转运速率，包括根木质部装载、茎木质部导管运输、叶肉吸收、液泡区隔等过程

3）定量测定重金属存在的条件下，动植物组织、细胞对Mg²⁺、K⁺、Ca²⁺等元素吸收速率的变化，研究重金属导致的元素失衡过程

4）定量测定活体样品内外部不同位置的Cd²⁺/Cu²⁺/Pb²⁺浓度

2、机制

1）Ca²⁺信号
以Cd²⁺/Cu²⁺/Pb²⁺吸收转运速率作为落脚点，从Ca²⁺信号促ROS 产生、ROS 调节质膜Cd²⁺/Cu²⁺/Pb²⁺转运载体，辅以Ca²⁺通道抑制剂、RBOH 抑制剂、ROS 清除剂等，验证Ca²⁺如何参与调控重金属吸收转运，验证Nramp、HMA、IRT、ZIP、Ctr、Fet4 等功能

2）泌H⁺调节根际pH
定量检测重金属胁迫下根部实时泌H⁺速率及根表pH，表征植物在重金属下通过促进养分吸收及排出重金属离子应对胁迫的能力

3）吸/ 泌O₂ 调节根际氧化还原电位

1、定量检测根、叶、藻、微生物等活样，对内/环境中NH₄⁺/NO₃^-/K⁺/Mg²⁺的实时吸收速率，验证NRT、CLC、SLAC、AMT、MEP、HAK、HKT、MGT、MHX等功能

2、定量检测NH₄⁺/NO₃^-/K⁺/Mg²⁺在活体植物体内的实时转运速率，包括根木质部装载、茎木质部导管运输、叶肉吸收等过程

3、定量检测NH₄⁺/NO₃^-/K⁺/Mg²⁺/Fe²⁺等吸收转运过程中，H⁺的动态变化（H⁺转运速率）及pH，揭示OSA、AHA 等参与养分元素吸收转运的机制

4、定量检测液泡转运NH₄⁺/NO₃^-/K⁺的实时速率与方向，研究细胞内氮钾内稳态，验证NHX、CLC 等功能

5、定量检测高NH₄⁺/高NO₃^-胁迫下，活体根系实时排NH₄⁺/NO₃^-的速率

定量检测活体细胞、组织的实时跨膜H⁺流，验证AHA、OSA、PMA、VHA等功能

定量检测活体细胞、组织的实时跨膜Ca²⁺流，验证CNGC、GLR、OSCA、NLR、TPC等功能

• NMT 耐盐机制分析仪


• NMT 重金属阻控机制分析仪


• NMT 植物养分高效机制分析仪

附录1：生物离子分子组学计划

附录2：《非损伤微测技术 论文集》

附录3：基金标书NMT实验协助撰写

附录4：NMT 耗材费、检测费核算

附录5：实验步骤撰写参考

一棵参天大树也必须从一粒种子的萌发开始。《旭月东升》从非损伤微测技术的发明人，许越教授的个人经历为视角，与您分享一个科技创业者20年的心路历程。也是借助《NMT通讯》这个科普平台向读者讲述NMT 从诞生到发展壮大的鲜活故事。首先我们从本期连载的是《旭月东升》三部曲的第一部分鏖战美第八章 自豪与尊严